Lorsqu'elle atteint l'âge de 10 ans, Zoe Saldana et sa famille quittent New York pour s'installer en République Dominicaine. Là-bas la jeune fille se découvre un vif intérêt pour la danse et commence donc sa formation à la prestigieuse école de danse ECOS (Espacio de Danza Dance Academy). A 17 ans, Zoe Saldana et sa famille retournent vivre aux États-Unis. Bien qu'elle conserve une passion pour la danse, son intérêt pour le théâtre devient de plus en plus accru. Si bien qu'elle rejoint la troupe de jeunes comédiens Faces dont l'objectif est de fournir des messages positifs aux adolescents sur des sujets comme la drogue ou le sexe.
Ses connaissances en théâtre et en danse lui permettent de décrocher son premier rôle au cinéma avec Danse ta vie de Nicholas Hytner (2000) où elle joue une danseuse de ballet. Après avoir obtenu quelques seconds rôles dans des comédies romantiques, tel que Crossroads (2001) où elle joue aux côtés d'une certaine Britney Spears, Zoe Saldana décroche un rôle secondaire dans Le Terminal (2004) de Steven Spielberg où elle partage l'affiche avec Tom Hanks et Catherine Zeta-Jones. Elle y interprète une employée de l'aéroport fan de Star Trek.
Elle joue par la suite aux côtés d'acteurs confirmés comme Johnny Depp et Orlando Bloom dans Pirates des Caraïbes : la Malédiction du Black Pearl (2002). Elle retrouve d'ailleurs Orlando Bloom dans Haven (2006) de Frank E. Flowers. C'est grâce à la comédie Black/white (2004) que la belle se fait un nom. Dans ce film qui porte sur le racisme, elle donne la réplique à Bernie Mac et à Ashton Kutcher. L'actrice devient de plus en plus sollicitée. Elle fait même partie du casting prestigieux d'Angles d'attaque (2008) qui comprend, entre autres, Dennis Quaid, Forest Whitaker, Sigourney Weaver...
En 2009, elle obtient définitivement son statut de star en jouant dans deux des plus gros blockbusters de l'année. Tout d'abord, dans le Star Trek de J.J. Abrams, où elle est Uhura, l'officier des communications de la Starfleet. Puis en interprétant Neytiri, une habitante de la planète Pandora dans l'Avatar de James Cameron, film pour lequel elle retrouve Sigourney Weaver. Elle y partage aussi l'affiche avec Sam Worthington et Michelle Rodriguez. L'actrice devenue vedette tourne ensuite des films de moindre budget comme Panique aux funérailles (2010), une comédie grinçante où des obsèques familiales deviennent un lieu de règlements de comptes. L'année suivante, on la retrouve en tête d'affiche du musclé Colombiana du français Olivier Megaton, où elle incarne une impitoyable tueuse à gages qui ne vit que pour venger la mort de ses parents.
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