Matthew James Morrison décide d'être acteur après avoir participé très jeune à un atelier de théâtre, dans un centre de vacances pour enfants. Avant de se lancer, il étudie à l'Université de New York Tisch School of the Arts, puis à l'Ecole Supérieure des Arts d'Orange County, ainsi qu'à Los Alamitos High School. Sa carrière débute avec la comédie musicale de Broadway, "Footloose", rapidement suivie par "The Rocky Horror Show", auquel il participe. En 2002, c'est son rôle de Link Larkin dans la production de John Waters "Hairspay", qui le révèle au grand public. Nommé trois ans plus tard aux Tony Award pour "The Light in the Piazza", Matthieu Morrison s'impose dans le milieu du spectacle.
Dès lors, il commence à se montrer à la télévision et faire des apparitions dans des séries telles que Ghost Whisperer, Le Justicier de l'ombre ou encore Sex & the City. Le jeune acteur figure peu de temps au générique du soap opera As the World Turns avant de faire des apparitions au cinéma dans Coup de foudre à Rhode Island (2007) et Le Come-back (2008). Depuis mai 2009, Matthew Morrison est Will Schuester, professeur d'espagnol et directeur de la chorale du lycée McKinley dans la série télévisée Glee.
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